Indução e análise histológica de calos em explantes foliares de Jatropha curcas L. (Euphorbiaceae) / Induction and histological analysis of callus leaf explants of Jatropha curcas L. (Euphorbiaceae)

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de BAP e AIB sobre a formação de calos a partir de explantes foliares de Jatropha curcas L. (acesso JCUFS-012), descrever a curva de crescimento e realizar análise histológica dos calos. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, em esquema fatorial 5x4, com cinco concentrações de BAP (0,0; 0,5; 1,0; 2,0 e 3,0 mg.L-1) e quatro de AIB (0,0; 0,5; 0,75 e 1,0 mg.L-1). Durante o experimento, a curva de crescimento dos calos foi acompanhada e mensurada aos 0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 dias de cultivo. A análise histológica foi realizada a partir de calos crescidos em meio MS acrescido de 1,0 mg.L-1 de BAP e 0,5 mg.L-1 de AIB, após 60 dias de cultivo. A interação dos reguladores de crescimento BAP e AIB proporcionou a formação de calos compactos e posterior regeneração de brotações. Um maior número médio (6,2) de brotos por calo foi observado quando se adicionou ao meio de cultivo 1,65 mg.L-1 de BAP. A curva de crescimento de calos apresentou cinco fases distintas: lag, exponencial, linear, estacionária e desaceleração. Na análise histológica dos calos de J. curcas fica evidenciado a organogênese indireta pela formação de brotos adventícios, que apresentam conexão cambial com os tecidos dos calos.

The aim of this study was to evaluate the effect of IBA and BAP on callus formation from leaf explants of Jatropha curcas L. (accession JCUFS-012), describing the growth curve and histological analysis of the callus. The experimental design was completely randomized in a 5x4 factorial design with five concentrations of BAP (0.0, 0.5, 1.0, 2.0 and 3.0 mg. L-1) and four of IBA (0.0, 0.5, 0.75 and 1.0 mg.L-1). During the experiment, the growth curve of the calli was monitored and measured at 0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60 days of cultivation. Histological analysis was performed from calli grown on MS medium supplemented with 1.0 mg.L-1 of BAP and 0.5 mg.L-1 of IBA after 60 days of cultivation. The interaction of the growth regulators BAP and IBA provided the formation of compact calli and subsequent regeneration of shoots. A higher number (6.2) of shoots per callus was observed when 1.65 mg.L-1 of BAP was added to the culture medium. The growth curve of calli showed five distinct phases: lag, exponential, linear, stationary and deceleration. On histological analysis of callus J. curcas, indirect organogenesis was evidenced by the formation of adventitious shoots, that presented cambial connection with the callus tissue.

Protocol optimization and histological analysis of in vitro plant regeneration of RB92579 and RB93509 sugarcane cultivars / Otimização do protocolo e análise histológica da regeneração in vitro de plantas dos cultivares de cana-de-açúcar RB92579 e RB93509

The objectives of this study were to establish appropriate conditions for obtaining plant regeneration and acclimatization of the 'RB92579' and 'RB93509' sugarcane cultivars and to elucidate the shoots origin through histological analysis. For both cultivars, obtaining shoots showed better results with the culture of explants on a callus induction medium containing 2.0mg L-1 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, followed by cultivation on a shoot induction medium containing 0.1mg L-1 kinetin and 0.2mg L-1 benzilaminopurine. The MS medium without growth regulators proved to be appropriate for elongation and rooting of shoots and the use of the composed substrate of vermiculite + MS salts was effective for acclimatization. Histological analysis revealed that the origin of the shoots in both cultivars occurred through indirect organogenesis.

Os objetivos deste estudo foram estabelecer condições apropriadas para a obtenção de regeneração de plantas e aclimatização das cultivares 'RB92579' e 'RB93509' de cana-de-açúcar e elucidar a origem das brotações através da análise histológica. Em ambas as cultivares, as brotações obtidas apresentaram os melhores resultados com a cultura dos explantes em um meio de indução de calo contendo 2,0mg L-1 de ácido 2,4-diclorofenoxiacético, seguido do cultivo em meio indutor de brotações, contendo 0,1mg L-1 de cinetina e 0,2mg L-1 benzilaminopurina. O meio MS sem reguladores de crescimento foi adequado para o alongamento e enraizamento das brotações e da utilização do substrato composto de vermiculite + sais do meio MS, foi eficaz para a aclimatização. A análise histológica revelou que a origem das brotações em ambas as cultivares ocorreu via organogênese indireta.

Plant regeneration from cotyledonary explants of Eucalyptus camaldulensis dehn and histological study of organogenesis in vitro

The present work aimed at regenerating plants of Eucalyptus camaldulensis from the cotyledonary explants and describing the anatomy of the tissues during callogenesis and organogenesis processes, in order to determine the origin of the buds. The cotyledonary leaves of E. camaldulensis were cultured in Murashige and Skoog (MS), WPM and JADS media supplemented with 2.7 µM NAA and 4.44 µM BAP. The best results for bud regeneration were obtained on MS and WPM media (57.5 and 55 percent of calluses formed buds, respectively). Shoot elongation and rooting (80 percent) were obtained on MS/2 medium (with half-strength salt concentration) with 0.2 percent activated charcoal. Acclimatization was performed in the growth chamber for 48 h and then the plants were transferred to a soil:vermiculite mixture and cultured in a greenhouse. Histological studies revealed that the callogenesis initiated in palisade parenchyma cells and that the adventitious buds were formed from the calluses, indicating indirect organogenesis.

Este trabalho teve como objetivo a obtenção de plantas de Eucalyptus camaldulensis a partir de folhas cotiledonares e o estudo da anatomia dos tecidos durante a calogênese e organogênese para determinar a origem das gemas. Folhas cotiledonares foram cultivadas em meios de cultura MS, WPM e JADS suplementados com 2,7 µM de ANA e 4,44 µM de BAP. Os melhores resultados para a regeneração de gemas foram obtidos com os meios MS e WPM. Para o alongamento e enraizamento, o meio de cultura MS/2 contendo 0,2 por cento de carvão ativado apresentou-se eficiente para ambas as etapas. A aclimatização foi realizada mediante a abertura dos frascos na sala de crescimento por 48 horas, seguido da transferência para casa-de-vegetação com nebulização intermitente. Estudos histológicos foram conduzidos e revelaram que a calogênese teve início nas células do parênquima paliçádico e que as gemas adventícias formaram-se a partir dos calos, indicando a organogênese indireta.